전자 현미경 보고서
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작성일 23-01-31 22:39본문
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동결레프리타법은 막구조의 분석에 적합하다. 또 회절상에 의한 결정구조의 분석에서도 가능하다. 전자선이 시료를 투과할 때에 생기는 산란대조와 위상대조에 따라 상의 대조를 얻어낼 수 있다 초박절편법에서는 시료의 단편상(두께가 있는 3차원의 절편을 평면상)에 투영한 상을 observation한다.
① 1차 고정 : 2.5% glutaraldehyde in 0.1M phosphate buffer
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레포트 > 자연과학계열
- 목적 : 조직의 단면의 변화를 보기 위한 현미경
다.
✡ 투과전자현미경 (TEM : transmission electron microscopy)
< 전체적인 과정 > TEM용과 SEM용을 구별하여 준비 조직 접수 → 고정 → overnight 냉장→ TEM용 시료(99%이상)/SEM용 시료(1년에 20case 이내) 제조 → 퇴근 전 포매처리, overnight (80℃에서 블록을 형성) → 다음날 trimming 해서 semithin section → ultrathin section → 전자염색 → 전자현미경 촬영 → sacn → 컴퓨터로 확인
* 고정성은 좋으나 침투력이 낮아 조직을 세절 (1mm3 ) 해야함.
순서
설명
* 방향성이 있는 조직 (muscle, nerve)과 여러 층으로 된 조직(피부, 혈관,
전자 현미경 보고서
< 전체적인 과정 > TEM용과 SEM용을 구별하여 준비
전자현미경,현미경
- 자가융해에 의한 변화를 최소화하기 위해 신속한 고정이 필요.
1. 고정
조직 접수 → 고정 → overnight 냉장→ TEM용 시료(99%이상)/SEM용 시료(1년에 20case 이내) 제조 → 퇴근 전 포매처리, overnight (80℃에서 블록을 형성) → 다음날 trimming 해서 semithin section → ultrathin section → 전자염색 → 전자현미경 촬영 → sacn → 컴퓨터로 확인
평광한 전자선을 사용하여 시료를 투과시킨 전자선을 전자렌즈로 확대하여 observation하는 전자현미경. 직접배율의 범위가 통상은 100배에서 100만배가량의 상을 형광판 상에 투영하여 observation해 초미입자의 전자현미경용 필름에 기록한다. 바이러스 등의 외형이나 미세한 표면구조를 조사하는 방법으로서 음성염색법이 있다 저각도 투영법을 사용하면 정제한 핵산이나 단백질 등의 분포는 면역전자현미경법으로 분석한다. 초고압전자현미경에서 1μm 가량의 두꺼운 절편의 입체쌍사진을 촬영하는 것으로서 시료를 입체적으로 사용할 수 있다
- 원리 : 전자선이 고진공 (10-5 Torr 이하) 상태에서 초박절편 (60~100㎚)에 조사되면 전자선의 흡수, 산란, 투과에 의해 형광판에 상을 맺음으로서 observation 할 수 있다 분해능이 수 nanometer(㎚)이고 전자를 광원으로 사용함에 따라 이를 위해서는 초박절편을 만들어야 하며, 따라서 단단한 물질로 조직을 포매 할 필요가 있고 높은 진공과 전자빔에 견딜 수 있는 재질을 요구한다.